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LinG 3000 转染试剂 LinG 3000 Transfection Reagent
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LinG 3000 转染试剂是一款多用途的脂质体转染试剂，能够与 DNA 或 RNA 形成脂质复合物，转染多种不同的贴壁或悬浮细胞。与 LJL20514 相比，具有更小的毒性，在一些难以转染的细胞和常规细胞上表现出更高的转染效率。
| 货号 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|
| LJL20513S | 0.05ml | ¥85 |
| LJL20513M | 0.5ml | ¥650 |
| LJL20513L | 1.5ml | ¥1,250 |
¥85.00
¥150.00库存 99 件选择规格
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[组分信息]：
[使用说明]：
以 24 孔板转染 DNA 为例的操作步骤
Day 1:
贴壁细胞：转染前一天，在 500μL 不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，铺板密度 0.5-2×10
5 cells/mL，使得转染时的细胞汇合度达到 70%-90%；
Day 2:
注意：悬浮细胞的铺板是在当天制备转染复合物前，在 500μL 不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，铺板密度 4-8×10
5 cells/mL。
1. 转染试剂稀释液制备：取 1 个干净的 1.5 mL 离心管，向 25μL Opti-MEM™ I 培养基中加入 1μL Transfection Reagent。轻柔混匀后室温孵育。
2. DNA 稀释液制备：取 1 个干净的 1.5 mL 离心管，向 25 μL Opti-MEM™ I 培养基中加入 0.5 μg DNA。随后加入 1 μL Enhancer Reagent。
轻柔混匀后室温孵育。
3. DNA-脂质体复合物制备：将稀释后的 DNA/ Enhancer Reagent 混合物加入到稀释后的转染试剂中，轻柔混匀后室温放置 10-15 mins。
4. 将 DNA-脂质体复合物均匀滴加入细胞中，以十字交叉的方式进行轻柔混匀。随后将细胞培养板放入培养箱中进行培养，为保证足够的营养，建议 4-6 小时后对细胞进行换液，随后继续培养至鉴定时间，一般需要 48-96 h。
优化 DNA 转染：为获得较高的转染效率和较低的细胞毒性，通过改变细胞密度以及 DNA 和 LinG 3000 Transfection Reagent 的浓度来优化转染条件。确保细胞汇合度大于 90%，并在 DNA：LinG 3000 Transfection Reagent：Enhancer Reagent=1:1:2~1:4:2 的范围内进行调整。
以 24 孔板转染 siRNA 为例的操作步骤
Day 1:
贴壁细胞：转染前一天，在 500μL 不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，铺板密度 0.5-2×10
5 cells/mL，使得转染时的细胞汇合度达
到 60%-80%。注：在更低密度时 进行转染可以让转染和检测之间的时间间隔更长，并且使因细胞过量生长造成的细胞活力损失更小。
Day 2:
注意：悬浮细胞的铺板是在当天制备转染复合物前，在 500 μL 不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，铺板密度 4-8×10
5 cells/mL。
1. 将 siRNA 的储液用 DEPC 水稀释到 20 μM；
2. 转染试剂稀释液制备：取 1 个干净的 1.5 mL 离心管，向 25 μL Opti-MEMTM I 培养基中加入 1 μL LinG 3000 Transfection Reagent。轻柔混匀后室温孵育。
3. siRNA 稀释液制备：取 1 个干净的 1.5 mL 离心管，向 25 μL Opti-MEMTM I 培养基中加入 1 µL siRNA（20μM）。轻柔混匀后室温孵育。
4. siRNA-脂质体复合物制备：将 siRNA 稀释液加入到稀释后的转染试剂中，轻柔混匀后室温放置 10-15 mins。
5. 将 siRNA-脂质体复合物均匀滴加入细胞中，以十字交叉的方式进行轻柔混匀。随后将细胞培养板放入培养箱中进行培养，为保证足够的营养，建议 4-6 小时后对细胞进行换液，随后继续培养至鉴定时间，一般需要 48-96 h。
优化 siRNA 转染：为获得较高的转染效率和较低的细胞毒性，通过改变细胞密度以及 siRNA 和 LinG 3000 Transfection Reagent 的浓度来优化转染条件。对于 24 孔板，在 10-50 pmol siRNA 和 0.5-1.5 µL LinG 3000 Transfection Reagent 范围内优化转染条件。根据靶基因和靶
细胞的性质，在优化条件时也可考虑以更高密度转染细胞。mRNA 的转染步骤可以参考 siRNA 的转染步骤，在准备转染复合物的时候也不需要加 Enhancer Reagent。
建议的试剂用量和体积：
[储存方式]：
2~8℃保存，不可冷冻。
